类风湿性关节炎的新蛋白药物靶点

类风湿性关节炎 (RA) 是一种以关节退化为特征的自身免疫性疾病。使用甲氨蝶呤 (MTX) 等抗风湿药物可以改善活动性 RA 患者的临床结果。许多患者依靠 MTX 来限制 RA 典型的破坏性关节损伤和功能障碍。虽然该药物是一种叶酸拮抗剂，但其在 RA 患者中的确切机制在很大程度上是未知的。

先前的研究表明，MTX 还会影响一种称为 CD4 + T 细胞的白细胞。这些细胞被认为在 RA 的发展中发挥作用——特别是在产生白细胞介素 17 的辅助性 T (Th17) 细胞和 CD4 +调节性 T (Treg)的激活之间的平衡。研究人员怀疑MTX通过抑制T细胞活性和增加Treg细胞来影响CD4 + T细胞，但其除叶酸代谢外的具体作用尚不清楚。

最近，一组研究人员发现 MTX 靶向 CD4 + T 细胞中的肿瘤蛋白 p63 (TP63)。他们的研究结果于 2023 年 5 月 22 日在线发表在JCI Insight期刊第 8 卷中。该团队由千叶大学医学研究生院过敏与临床免疫学系和千叶大学高级学术研究所副教授 Akiro Suto 博士领导。它还包括千叶大学过敏和临床免疫学系的 Kensuke Suga 博士、Shigeru Tanaka 博士和 Hiroshi Nakajima 博士以及 Kazusa DNA 研究所应用基因组学系的 Osamu Ohara 博士。

“我们热衷于分析 MTX 治疗前后的基因表达，因为该药物可能靶向 CD4 + T 细胞，而且人们对其对活动性 RA 患者基因表达的影响知之甚少，” Suto 博士在讨论该团队的动机时解释道。继续研究。

研究人员对来自 RA 患者的人类 CD4 + T 细胞进行 DNA 微阵列分析，以了解 MTX 如何影响基因表达。他们还使用基因敲低(一种抑制靶基因的分子技术)和 RNA 测序 (RNA-Seq) 来验证基因功能。研究人员发现，TAp63 是 TP63 的一种蛋白质亚型，在人和小鼠 Th17 细胞中高度表达。Suto 博士说， “接受 MTX 治疗的患者的 CD4 + T 细胞中的 TAp63 信使 RNA 表达显着降低。MTX 还抑制了人和小鼠 Th17 细胞中的 TAp63 蛋白。小鼠 Th17 细胞中的 TAp63 抑制导致自身免疫性关节炎的改善在老鼠身上。”

RNA-Seq 和基因敲低数据显示，另一种基因FOXP3是 Treg 细胞的主要调节因子，被 TAp63 靶向。当 TAp63 在 Treg 细胞中被“敲低”时，Foxp3 蛋白表达增加。通过进行报告分析，研究人员证实 TAp63 与FOXP3增强子结合并对其进行了抑制。总之，这些发现表明 TAp63 与 Th17 和 Treg 细胞分化的平衡错综复杂地相关联。因此，抑制 TAp63 可以增强 Treg 细胞的抑制功能并限制自身免疫性 RA。

这些发现揭示了 MTX 作用的强大机制，并展示了 Treg 细胞如何在 RA 中得以保存。他们还展示了 TAp63 作为 RA 新治疗靶点的潜力。