lb培养基的配方及制作过程? lb培养基的配制步骤
网上有很多关于lb培养基的配方及制作过程?的问题,也有很多人解答有关lb培养基的配制步骤的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、lb培养基的配方及制作过程?
LB培养基的制备:1。成分:胰蛋白胨)10g酵母膏)5g氯化钠10g固体培养基加琼脂粉15-20g和双蒸水至1000mL,用5mol/L NaCl(约0.2ml)调节pH至7.2,121灭菌30min。(2)溶解:在烧杯中加入2/3蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使药物完全溶解。用1mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.2。
将溶液倒入定容量筒中,加水至所需体积。加入琼脂,加入所需量的琼脂,加热融化,以弥补水分损失。包装、封堵和包扎。100Pa压力蒸汽灭菌20min。
二、LB培养基如何配制?
以一升培养基的配制为例:你要将:胰蛋白胨10g酵母膏5g加入到950 ml去离子水中,摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调节pH至7.0,用去离子水调节体积至1L。15磅/平方英寸的高压蒸汽灭菌21分钟。扩展数据:配置策略:
1、选择合适的营养物质就微生物的主要种类而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类和病毒,培养它们所需的培养基也不同。实验室常用牛肉酱蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I合成培养基培养放线菌,一般用酵母培养麦芽汁培养基,一般用霉菌培养夏加尔合成培养基。
2、合适的营养浓度和比例培养基中的营养浓度合适,微生物才能生长良好,营养浓度过低时,不能满足微生物的正常生长,浓度过高时,可能会抑制微生物的生长。
此外,培养基中营养物的浓度比也直接影响微生物的生长繁殖和/或代谢产物的形成和积累,其中C/N比影响较大。严格来说,碳氮比是指培养基中碳氮的比例,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白的比例。3、 pH控制条件
培养基的pH值必须控制在一定范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的最适pH条件是不同的。一般来说,细菌和放线菌适合在pH7-7.5范围内生长,而酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。
值得注意的是,在微生物生长、繁殖和代谢过程中,由于营养物质的分解利用和代谢产物的形成积累,培养基的pH值会发生变化。如果不控制培养基的pH条件,微生物的生长速度往往会降低或(和)代谢产物的产量会降低。4、控制氧化还原电位
不同类型的微生物对氧化还原电位(F)有不同的要求。一般好氧微生物在F值在0.1V以上就能正常生长,一般以0.3-0.4V为宜。厌氧微生物只能在0.1V以下生长,兼性厌氧微生物在F值0.1V以上进行有氧呼吸,0.1V以下发酵.5、原材料来源的选择
在配制培养基时,应尽可能使用廉价易得的原料作为培养基成分,尤其在发酵工业中,培养基用量大,使用低成本的原料显示其经济价值。6、消毒
为了获得微生物的纯培养物,必须避免杂菌的污染,因此所用的设备和工作场所应进行消毒和灭菌。对于培养基,需要进行严格的灭菌。一般来说,培养基是用高压蒸汽灭菌的。一般培养基在121.3下1.05kg/cm2灭菌15-30分钟即可。
在配制培养基的过程中,泡沫的存在对灭菌极为不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使得泡沫中的微生物难以被杀死。因此,有时需要在培养基中添加消泡剂,以减少泡沫的产生或适当提高灭菌温度。
以上就是关于lb培养基的配方及制作过程?的知识,后面我们会继续为大家整理关于lb培养基的配制步骤的知识,希望能够帮助到大家!
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