为什么采用反相液相色谱？ 反相高效液相色谱法原理

网上有很多关于为什么采用反相液相色谱？的问题，也有很多人解答有关反相高效液相色谱法原理的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、为什么采用反相液相色谱？

二、高效液相色谱分析法的原理是什么？

一、为什么采用反相液相色谱？

由物质的化学性质决定。如果样品的极性相对较大，一般使用反相色谱法。液相色谱可分为正相和反相。反相液相色谱柱因其效率高、分离能力强、保留机理明确，是液相色谱中应用最广泛的分离方式。可以用反相色谱分离的物质应优先考虑。

二、高效液相色谱分析法的原理是什么？

分离原理：液-液分配色谱和化学键合相色谱，流动相和固定相都是液体。流动相和固定相应互不相溶(极性不同，避免固定液流失)，并有明显的界面。当样品进入色谱柱时，溶质分布在两相之间。

达到平衡时，服从高效液相色谱的计算公式：K=Cs/Cm=k*Vm/Vs a .正相液相色谱：流动相的极性小于固定相的极性。b .反相液相色谱：流动相极性大于固定相极性。

C.液-液分配色谱的缺点：虽然流动相和固定相的极性要求完全不同，但固定相仍有少量溶出；流动相通过色谱柱时的机械冲击会造成固定液的损失。20世纪70年代末开发的化学键合固定相(见下文)可以克服上述缺点。现在广泛使用(70~80%)。液固色谱的流动相是液体，固定相是吸附剂(如硅胶、氧化铝)。这种分离是根据物质吸附的不同而进行的。

其机理是当样品进入色谱柱时，溶质分子(X)和溶剂分子(S)竞争吸附吸附剂表面的活性中心(不进样时，吸附剂的所有活性中心都吸附S)，可表示为：Xm NSA====xansm:Xm-流动相中的溶质分子；Sa -固定相中的溶剂分子；Xa -固定相中的溶质分子；Sm -流动相中的溶剂分子。当竞争吸附反应达到平衡时，K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]其中K为吸附平衡常数。

【讨论：k越大，保留值越大。]

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