双缩脲检验蛋白质原理，实验现象是什么？ 双缩脲试剂检测蛋白质的原理

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一、双缩脲检验蛋白质原理，实验现象是什么？

二、双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么？

一、双缩脲检验蛋白质原理，实验现象是什么？

蛋白质缩二脲试剂检测的原理是缩二脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应生成红紫色的络合物，称为缩二脲试验。蛋白质分子中含有许多与缩二脲结构相似的肽键，因此也能起缩二脲试验，形成红紫色复合物。

缩二脲试剂最初用于检测缩二脲。由于蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键，在碱性溶液中也能与铜离子生成缩二脲试验。当底物含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可以通过比色法进行分析。双缩脲法测定蛋白质的优缺点：

优点：双缩脲法测定蛋白质的范围为1~10mg蛋白质，操作简单快速。既适合手工操作，也适合自动分析，重复性好，线性关系好，双缩脲试剂可长期保存。缺点：灵敏度差，测量范围窄，样品要求大，不同蛋白质产生的颜色深浅相似，所以常用于快速但不是很准确的蛋白质测定。

干扰测定的物质包括：性质为氨基酸或肽类的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性显色反应，铜离子也容易被还原，有时会出现红色沉淀。

二、双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么？

由于蛋白质中含有许多与缩二脲结构相似的肽键，缩二脲试剂在碱性溶液中能与蛋白质反应生成紫色络合物。因此，蛋白质检测的实验原理是缩二脲试剂与紫色蛋白质反应。

用于检测缩二脲时，蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键，因此在碱性溶液中也能与铜离子生成缩二脲试验。当底物含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-16毫克/毫升。双缩脲试剂的蛋白质评价；

优点：双缩脲法测定蛋白质的范围为1~10mg蛋白质，操作简单快速。既适合手工操作，也适合根际自沉淀的自动分析，重复性好，线性360问答系统好，双缩脲试剂可长期保存(如果保存瓶中出现黑色沉淀，需重新配制)。

缺点：灵敏度差，测量范围窄，样品需求量大，不同的蛋白质六打晶体产生的颜色深浅差不多，所以常用于需要快速，但不需要卖光的蛋白质测定。干扰测定的物质包括性质为氨基酸或肽类的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性显色反应，铜离子也容易被还原，有时会出现红色沉淀。以上内容均测试：百度百科-缩二脲试剂

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