二氨基联苯胺的测定方法？ 联苯胺法

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一、二氨基联苯胺的测定方法？

二、二氨基联苯胺光度法

三、血迹的联苯胺试验

一、二氨基联苯胺的测定方法？

DAB染色法又称二氨基联苯胺法，用于检测细胞内过氧化物酶的活性位点。原理：细胞颗粒中的过氧化物酶能释放出过氧化氢中的氧，氧化二氨基联苯胺形成金黄色沉淀，沉淀位于过氧化物酶的活性部位。使用前将B色溶液(1:25)用蒸馏水稀释成工作液，然后按比例(1:25)加入A色溶液，混合后立即使用。

显色时间为1-30分钟。如果显色时间过长，背景会增大。因此，应密切观察显色过程(一般以3-10分钟为最佳)，在背景较浅且达到合适的显色强度时，用流水冲洗终止显色反应。方法

二、二氨基联苯胺光度法

水样用酸性高锰酸钾消化，用盐酸将硒()还原成硒()。在酸性条件下，硒()与3，3’-二氨基联苯胺四盐酸盐形成黄色络合物，用甲苯在ph68时萃取，在420nm波长下用分光光度法测定。

该方法适用于河口和海水中硒的测定。该方法的检出限为0.4 g/L。电热板铺的是3cm厚的精细结构，在滑行期很难得到最好的效果。水浴锅。离心机。试剂盐酸。氢氧化铵。无水硫酸钠在500灼烧4h。20 ~ 40目的活性炭在300下活化4h。甲苯用活性炭吸附，用滤纸过滤。高锰酸钾溶液C (KMNO _ 4)=0.1mol/L称取1.58gKMnO4 _ 4，溶于90mL水中，稀释至100mL，混匀。

氢氧化钠溶液(0.1mol/L)称取2gNaOH，溶于水中，稀释至500mL，混匀。EDTA溶液(0.2mol/L)称取74g乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na 2H360 Q&A 2O)溶于水，稀释至1000mL，混匀。盐酸羟胺溶液(200克/升)称取盐酸羟胺20克，溶于水中，口服转移至沙茨鸡，稀释至100毫升，混匀。称取3，3’-二氨基联苯胺四盐酸盐溶液(DAB)(5g/L)并溶解于水中。如果有残渣，一定要过滤。最后用水稀释至100mL。电流相位条纹晶体周期的分析与制备

给出了溶液(Se)=1.00毫克/毫升的硒标准储备。称取一个假快速周转技术孔，滚动0.1405g二氧化硒(SeO2)，溶于少量水中，转移至100mL容量瓶中，用0.1 mol/l field Cl稀释至刻度，混匀。硒标准溶液(Se)=1.00g/mL，用0.1mol/LHCl逐级稀释硒标准储备溶液。校准曲线取六个500mL平底烧瓶，分别加入0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL(1.00g/mL)硒标准溶液，加水至500mL。

滴加HCl至溶液pH值约为2.5，加入3 ~ 5滴0.1mol/LKMnO4溶液，使溶液呈淡紫色，置于电热板上加热浓缩。如果加热过程中紫色褪色，应滴加0.1mol/LKMnO4溶液，使溶液保持浅紫色。蒸至体积减半，加入5ml 0.1mol/LNA体样，从每个附着的好望角血中调查OH溶液，继续蒸至近干。取出冷却，加入8 ~ 10毫升盐酸和10毫升水，使溶液的酸度为4 ~ 6摩尔/升.在100的沙浴中加热10分钟，将硒()转化为硒()。

将溶液转移到100mL锥形瓶中，用凉州水冲洗平底烧瓶内壁。将洗涤液合并到锥形瓶中，加入2ml 200g/浓盐酸羟胺溶液和2ml 0.2mol/ledta溶液，在酸度计上用HCl或NH4OH调节溶液的pH值为1 ~ 2，最后加水至约50mL。加入2mL5g/LDAB，室温下放置一级北梯二房盐1h。用NH4OH将样品溶液的pH值调节至6 ~ 8。

将样品溶液转移至125mL分液漏斗中，加入5.00mL甲苯，摇匀1min，静置分层，弃去水相，有机相置于离心管中离心。或用董藩的表观水Na2SO4脱水，将甲苯提取液置于3cm比色皿中，用甲苯调至零，在420nm波长处测定吸光度A0和Ai。以Ai-A0(标准空白)为纵坐标，相应的硒含量(g)为横坐标，绘制校准曲线。分析方法

取500mL经0.45m滤膜过滤的海水，置于平底烧瓶中。滴加HCl，直到溶液的pH值约为2。加入3 ~ 5滴0.1mol的溶液，称为“货架调节牛香王生/LKMnO4”，使溶液呈淡紫色。按照绘制校准曲线的步骤测量吸光度Aw。同时测定并分析了空白吸光度ab。用Aw-Ab检查校准曲线的硒含量。水样中硒浓度的计算见公式(78.30)。注意事项1)所有使用的玻璃器皿在(1 1)HNO3中浸泡2 ~ 3天，然后用自来水和去离子水清洗。

2)DAB在空气和光照下容易分解，需要密封避光保存。3)海水蒸发浓缩测定样品时，温度应控制在170以下，以避免盐沉淀和飞溅。4)海水样品的制备和体积校准见78.23.1中的步骤。

三、血迹的联苯胺试验

血渍中血红蛋白的过氧化物酶活性使过氧化氢释放出新的生态氧，将无色联苯胺氧化成翠蓝色联苯胺蓝。灵敏度很高，血液稀释到20-30万倍，还是阳性。但联苯胺不是血液特异性反应，自然界中很多物质都含有过氧化物酶，也会引起阳性反应。

试验时，剪下或刮下少许样品，放在滤纸或白色磁板上，加入一滴联苯胺无水乙醇饱和溶液、冰醋酸和过氧化氢。如果是血渍，会立即出现翠蓝色作为阳性反应。当斑点难以去除时，可用蒸馏水浸泡过的滤纸擦拭斑点，使斑点上的物质迁移到滤纸上，再用同样的方法进行试验。扩展数据：

根据预试验结果，对可能是血渍的样本进行筛选，然后进行确认试验，从而做出是血渍阴性或阳性的结论。是人血还是动物血？对于肯定是血渍的样本，进行种属检验，确定是否是人血。对于不是人血的样本，可以根据需要进行各种动物血检测，以确定是哪种动物血。

是什么血型？做ABO血型检测和其他血型检测。其他问题。测量血痕性别、出血部位、出血时间和出血量。血液检验可以为案件的侦破和审理提供极其重要的线索和依据。

以上就是关于二氨基联苯胺的测定方法？的知识，后面我们会继续为大家整理关于联苯胺法的知识，希望能够帮助到大家！