如何操作高效液相色谱仪? 高效液相色谱仪操作步骤
网上有很多关于如何操作高效液相色谱仪?的问题,也有很多人解答有关高效液相色谱仪操作步骤的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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三、如何使用液相色谱
一、如何操作高效液相色谱仪?
HPLC的操作步骤如下1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2.将过滤后的流动相超声脱气10-20分钟。3.打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接流动相管道和检测系统。4.进入hplc控制界面主菜单,点击手动进入手动菜单。5、有一段时间没用了,或者用了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。
6、调节流速。第一次使用新的流动相时,可以先试试压力。流量越大,压力越大,一般不超过2000。7、设计别名方法。8.注射和注射后的操作。9.关电脑时,先关电脑,再关液相色谱。10、填写登记簿,由负责人签字。11、流动相需要色谱纯度,水用20m去离子水。12.柱子很脆弱。第一次,不要让液体通过柱子。
13、所有通过色谱柱的液体都应严格过滤。压力不应太高,最好不超过2000 psi。
高效液相色谱(HPLC)又称为高压液相色谱、高速液相色谱、高分辨率液相色谱和现代柱色谱。它是生物化学和分析化学中常用的柱色谱仪。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。以液体为流动相,用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲液泵入固定相的色谱柱中。柱内组分分离后,进入检测器进行检测,从而实现对样品的分析。该方法能有效、方便、快速地解决化学、医学、工业、农业、商检、法检等领域所需数据的获取问题,已成为一种重要的分离分析技术。
二、高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项
去百度文库查完整内容。内容来自360问答用户:夏长伟高效液相色谱仪操作步骤及注意事项一、操作步骤:
1.开机前过滤流动相并进行超声波处理:将水流动相用混合滤膜(0.2m)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,然后进行超声波脱气15-20分钟。过滤的目的是去除流动相中的杂质,防止杂质进入色谱柱,堵塞色谱柱;超声的目的是去除流动相中的气体,防止气体进入色谱柱损坏色谱柱,影响柱效。
注:实验中只使用了0.45m的混合滤膜,第一次使用时效果不好,所以用两个热拉伸混合滤膜同时过滤水的流动相。2.超声结束后,将流动相置于指定位置(1号泵接水流动相,2号泵接有机流动相),开机逐一排气(先开泵,排气后再开检测器)。
3.排气后,关闭所有排气阀。用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟,然后打开水流动相(注:最银顶相和有机流动相的流速之和为1ml重量/min),继续走基线,直到基线稳定。
注意:实验结束后,用纯有机流动相冲洗叶华厂贝准福的色谱柱20-30分钟,将色谱柱内残留的样品物质冲洗掉,防止长时间不使用仪器后残留物质沉积在色谱柱内,造成下次洗柱困难,色谱柱柱压高,基线不稳定,出现大量鬼峰。(不同规格色谱柱的最大允许流速与滑动流向之和不同。)
4.取基线时,进样阀应处于Lo联合电位和ad平衡状态。用注射器注射时,应快速注射,并立即将注射阀拉回Bu 3。注射后
三、如何使用液相色谱
1.电源准备打开调压器的电源开关,电压指示为220V V后才能打开其他相关设备.
2.LC-600高效液相色谱仪制备试剂:三氟乙酸乙腈超纯水(密理博超纯水)冰醋酸溶液配置:储液瓶和流动相的制备A溶液0.1%三氟乙酸(1ml三氟乙酸,999ml超纯水)室温保存,B溶液60%乙腈(600ml乙腈,400ml超纯水)室温保存。
使用干净的G4玻璃砂漏斗对流动相溶剂进行精细过滤,以去除细小颗粒(目前为未过滤的溶液)。操作者必须清楚地指出储液瓶A和B中含有哪种溶剂.
冲洗泵头:用注射管在柔性塑料管末端抽水,直到有水流出,调节流量开关,控制流量为20-30滴/分钟。(如果流动相管道中有许多气泡,可以通过弹跳管道并逆时针旋转脱气泵的活塞将其松开来消除气泡,并用注射管在流动相出口处的塑料管末端进行抽吸,直到管道中的气泡完全消除。操作时,我们一般会打开除气器(气泡严重影响分离效果,所以观察管道内液体是否有气泡非常重要。
)开机进入LC-600高效液相色谱仪操作系统终止和保存数据记录3。关闭1)关闭N2000色谱工作站。在N2000主操作界面上点击图标关闭泵和检测器,或者通过菜单关闭。关闭电脑主机和显示器。用布盖住所有仪器。关闭排气扇、空调和调压器的开关。2)清洁实验结束后,清洁仪器室的桌面和地面,保持桌面清洁。
3)在指定的笔记本上记录当天的仪器使用情况,包括仪器使用的起止时间和解决问题的方法,并签上操作者的名字。以上是液相色谱仪的使用方法。
以上就是关于如何操作高效液相色谱仪?的知识,后面我们会继续为大家整理关于高效液相色谱仪操作步骤的知识,希望能够帮助到大家!
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