标本固定液甲醛溶度是多少？ 多聚甲醛固定细胞步骤

网上有很多关于标本固定液甲醛溶度是多少？的问题，也有很多人解答有关多聚甲醛固定细胞步骤的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、标本固定液甲醛溶度是多少？

二、细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤是什么?

一、标本固定液甲醛溶度是多少？

甲醛在样品固定液中的溶解度是多少？

？答：甲醛含量为35%至40%(一般为37%)的水溶液中还加入了10%至15%的甲醇以防止聚合。具有防腐、消毒、漂白作用，又叫福尔马林固定剂。名词解释：福尔马林固定液是一种无色液体，有刺激性气味。福尔马林的主要成分是甲醛，甲醛是一种刺激性很强的有毒气体，易溶于水。它易燃且具有腐蚀性，通常可以在空气中检测到微量。在制造甲醛的过程中，通常是通过氧化甲醇的化学方法制造的。

甲醇氧化后可以得到甲醛，甲醛氧化后可以得到甲酸。这三种都是有毒物质。相同剂量下，就对人体的毒性而言，毒性比为甲醇：甲醛：甲酸=1: 30: 6，即甲酸的毒性是甲醇的六倍，而甲醛的毒性是甲醇的三十倍。福尔马林是甲醛的水溶液，一般含有37-40%的甲醛气体。加入8-15%的甲醇可以阻止甲醛的聚合。

为无色液体，有强烈刺激性气味，沸点96，相对密度(比重)1.081 ~ 1.086，呈弱酸性。如果长时间存放在冰箱或室温下，水溶液中会析出白色沉淀，即多聚甲醛，加热后可变成液体，所以福尔马林不适合放在冰箱里冷藏，否则容易凝结[3]。

福尔马林不能与强氧化剂、强碱、酚类、尿素等物质接触，容易引起化学反应，造成危险。药理作用：35 ~ 40%甲醛水溶液称为福尔马林，它阻止核蛋白的合成，抑制细胞分裂，抑制核和细胞质的合成，导致微生物死亡[2]。用途：能有效杀灭细菌繁殖体，以及孢子(如炭疽孢子)，以及耐药的结核分枝杆菌和病毒[4]。

多用于畜禽棚、仓库、渗血室、皮毛、衣物、器皿等的熏蒸消毒。并保存标本和尸体；也用于胃肠发酵。

二、细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤是什么?

我在单元实验室做过。对了，边肖推荐的细胞爬片是上海静安生物公司买的，实验效果不错。细胞爬片免疫荧光的步骤如下：1 .静安生物细胞爬片；首先是载玻片的处理，普通盖玻片用砂轮切成自身大小的小方块，用洗衣粉清洗，用水冲洗后晾干，然后用酸浸泡过夜，酸洗后用流水冲洗，晾干，器皿高压灭菌，烘箱烘干8小时左右。

爬升板可用于培养皿中的6孔板或24孔板。我选择爬进培养皿。一是省钱(培养皿可以重复使用)，二是培养皿口大，操作方便。

培养皿消毒同上。消毒的时候记得拿掉两个镊子。具体操作是：用胰酶消化细胞，充分吹，制成单细胞悬液(注意：这个很重要，关系到以后要爬出来的膜的质量)。取出消毒过的培养皿。可以先加入少量的培养基(使载玻片与培养皿紧密接触)，小心翼翼地将载玻片放入其中，然后将单细胞悬液滴在载玻片上。

最后盖上培养皿，放入375% CO2培养箱中培养。根据细胞生长状况，适时取出爬片，放置24小时以上。每次在37度PBS中清洗爬片3至5秒，然后在4%多聚甲醛中固定15分钟，再用37度去离子水冲洗甲醛。注意手法要轻柔，不然药片会脱落的很厉害。同时，操作时要注意滑梯的前后，否则真的会事倍功半。将准备好的攀爬载玻片放在滤纸上晾干，然后用中性树粘在载玻片上。

注意，一定要等到中性胶完全干了，才能做后续实验，否则载玻片会掉下来，之前的努力都白费了。制备好的细胞爬片可保存在-20下备用。不清楚它能保存多久。当然，应该尽早使用。

用2.4%多聚甲醛固定10分钟(用预冷的70%甲醇和30%丙酮固定细胞器)；3.PBS漂洗5分钟；用4.0.5%曲拉通穿孔15分钟(丙酮固定法不需要透化)；5.用5冲洗两次。PBS 5min；每一次；6.1%牛血清白蛋白封闭30分钟；7.加入用1%BSA稀释的一抗，37杂交2h；8.PBS漂洗两次，5min每一次；9.加入1%BSA稀释的二抗，37杂交1h；10.PBS漂洗两次，5min每一次；11.5微克/毫升DAPI染色2分钟；12.防淬灭药片密封。抗猝灭片剂：2.5% dabco(w/v)50mm tris(ph 8.0)90%甘油。

以上就是关于标本固定液甲醛溶度是多少？的知识，后面我们会继续为大家整理关于多聚甲醛固定细胞步骤的知识，希望能够帮助到大家！