提高高效液相色谱柱效的方法 高效液相色谱柱

网上有很多关于提高高效液相色谱柱效的方法的问题，也有很多人解答有关高效液相色谱柱的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

内容导航：

一、提高高效液相色谱柱效的方法

二、如何有效选择高效液相色谱柱

一、提高高效液相色谱柱效的方法

1、使用细粒填料可以获得高的柱效。2、降低流动相的速度使得渗透时间更长，这有利于实现高的柱效率。3、流动相粘度低，溶质在流动相中的扩散系数大，有利于加速传质，获得较高的柱效。4、使用低配比固定液有利于降低固定相的传质阻力，提高柱效。

5、提高温度可以降低流动相和固定相的粘度，增加组分的扩散系数，改善传质，提高柱效。6、组件的扩散系数还取决于组件本身的结构。大分子的扩散系数小，不利于获得高的柱效。扩展数据HPLC具有“四高一宽”的特点：高压：流动相为液体，流经色谱柱时受到很大阻力。为了快速通过色谱柱，必须对载液施加高压。

速度快：分析速度快，载液流速快，比经典液相色谱快很多。通常分析一个样品需要15 ~ 30分钟，有的样品甚至可以在5分钟内完成，一般不到1小时。高效：分离效率高。可以选择固定相和流动相，达到最佳的分离效果，比工业蒸馏塔和气相色谱仪高出许多倍。高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，样品体积在 l量级.

应用范围广：高效液相色谱可以分析70%以上的有机化合物，特别是沸点高、大分子、极性强、热稳定性差的化合物的分离分析，显示出优势。参考资料来源

二、如何有效选择高效液相色谱柱

选择HPLC色谱柱之前应该做些什么？在选择液相色谱柱之前，要详细了解自己的样品和杂质，它们的种类、结构、极性、酸碱性、分子量等等。

1、样品呈极性弱酸性；可以选择C18在100%酸性水溶液的条件下进行检测，也就是要选择承受100%纯水，对极性化合物保留较好的色谱柱。

2、如果样品极性太强或酸性太强；可以选择CN，NH2，或者硅胶柱，液相色谱柱(亲水色谱)，或者C18强阴离子对试剂或者强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长，流动相pH更精确，否则很难重复实验，离子对试剂也很难洗掉，所以基本使用离子对试剂的色谱柱不能用于其他实验)。

3、如果样品是碱性的；可以选择高纯度硅胶柱(高纯度硅胶缺少金属杂质，硅胶的端基是封闭的)或者一些改性的C18柱(如极性包埋技术或者碱失活技术等。)，这样会减少碱性化合物的拖尾，一般选择中性或碱性条件，因为这样可以增加碱性样品的保留。

4、如果碱性化合物的极性太强，或者碱性太强；可以选择宽pH的C18液相色谱柱在高pH值下检测(优点是方法开发简单，缺点是目前真正实现该技术的色谱柱品牌少，价格高)或者选择液相色谱柱(反相使用硅胶柱，也是检测碱性样品的经典方法)，选择强离子交换柱，使用C18强阴离子对试剂或者强阴离子交换柱。

以上就是关于提高高效液相色谱柱效的方法的知识，后面我们会继续为大家整理关于高效液相色谱柱的知识，希望能够帮助到大家！