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若用三氯醋酸沉淀pi=6.8的蛋白质时,该溶液的ph值最好为? 三氯乙酸沉淀蛋白步骤

2023-03-15 13:08:05科技帅气的蚂蚁
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若用三氯醋酸沉淀pi=6.8的蛋白质时,该溶液的ph值最好为? 三氯乙酸沉淀蛋白步骤

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一、沉淀蛋白质的方法有哪些,各有和特点?

二、若用三氯醋酸沉淀pi=6.8的蛋白质时,该溶液的ph值最好为?

一、沉淀蛋白质的方法有哪些,各有和特点?

盐析:在蛋白质溶液中加入高浓度中性盐,破坏了胶体的稳定性,中和了蛋白质携带的电荷,也破坏了水合膜。用这种方法沉淀的蛋白质一般不变,中性盐可以通过透析除去,其生物活性仍然保持。

有机溶剂:利用其强亲水性破坏水合膜。因为它们不能中和蛋白质的电荷,所以需要在pI附近沉淀蛋白质。低温下变性发生缓慢,可用于制备血浆蛋白。它在室温下会变性。

重金属盐:带负电荷的蛋白质与带正电荷的重金属离子结合,形成不溶性盐沉淀。当使用它时,需要将pH调节到大于pI,这通常会导致变性。

生物碱试剂与某些酸:带正电荷的蛋白质能与生物碱试剂的酸根(如苦味酸、单宁酸、钨酸)或某些酸(如三氯乙酸、硝酸、高氯酸)成盐沉淀。一般会出现退行性变。临床上用于血液化学分析,这种方法常用于去除血液中的蛋白质。

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二、若用三氯醋酸沉淀pi=6.8的蛋白质时,该溶液的ph值最好为?

三氯乙酸沉淀法是常用的蛋白质沉淀方法,其最适pH值一般在4-5之间。这是因为在这个pH范围内,蛋白质分子带负电荷,与三氯乙酸分子相互作用,可以有效沉淀蛋白质。因此,向pi为6.8的蛋白质中加入三氯乙酸进行沉淀时,最好将pH值调整到4~5左右,以获得最佳的沉淀效果。可以通过使用乙酸钠/乙酸调节缓冲溶液来调节pH值。齐恒雀

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