装填凝胶柱时为什么不能有气泡 凝胶色谱柱的装填

网上有很多关于装填凝胶柱时为什么不能有气泡的问题，也有很多人解答有关凝胶色谱柱的装填的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、生物凝胶色谱柱的装填中为什么要加缓冲液？什么是洗涤平衡？

二、装填凝胶柱时为什么不能有气泡

一、生物凝胶色谱柱的装填中为什么要加缓冲液？什么是洗涤平衡？

在色谱分析过程中，缓冲液是必不可少的，因为它是用来调节流动相的pH值的，而凝胶色谱柱在填充后应立即用缓冲液充分冲洗。主要目的是均匀、紧密地清洗柱子。

2.洗涤平衡就是保持PH值稳定在一定范围内。

3.缓冲盐使用不当会造成一些不利影响，如柱压升高、柱效下降、保留时间异常等：

1.塔压力增加；

原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐沉淀，堵塞塞板与键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相的传质，导致柱压升高。

2.同一化合物的保留时间发生变化；

原因：如果样品不经洗涤直接进样，由于色谱柱中含有盐，化合物的保留时间会发生变化。

3.柱效率降低；

原因：部分缓冲盐会渗透到键合相深处，破坏硅胶基质，导致色谱柱键合相流失，柱床松动，柱效下降；键合相表面的冷凝使C18碳链难以伸展，物质的保留能力下降，导致柱效下降。因此，使用缓冲盐后必须对色谱柱进行冲洗，在水中缓冲盐浓度较大时要特别注意。

二、装填凝胶柱时为什么不能有气泡

A、填充凝胶色谱柱时，凝胶要均匀填充在色谱柱内，不能有气泡，因为气泡会影响蛋白质的洗脱顺序，A是正确的；B，图A中，大分子蛋白质由于不容易进入凝胶内部的通道，先流出色谱柱，距离短，移动速度快，B是错的；C、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳焦点的迁移率完全取决于分子大小，所以图B中在凝胶中加入SDS可以完全隐藏取决于分子大小的蛋白质迁移率，C是正确的；D、凝胶中SDS带负电，所以电泳槽的接电源负极，接电源正极，D正确。所以选了B。

以上就是关于装填凝胶柱时为什么不能有气泡的知识，后面我们会继续为大家整理关于凝胶色谱柱的装填的知识，希望能够帮助到大家！