usp高效液相色谱法？ 高效液相色谱法的应用

网上有很多关于usp高效液相色谱法？的问题，也有很多人解答有关高效液相色谱法的应用的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

内容导航：

一、usp高效液相色谱法？

二、高效液相色谱法的优缺点

三、高效液相色谱法在分析实际样品时有哪些应用

四、液相色谱的用途！！？

一、usp高效液相色谱法？

高效液相色谱(HPLC)又称为高压液相色谱、高速液相色谱、高分辨率液相色谱和现代柱色谱。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。以液体为流动相，用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲液泵入固定相的色谱柱中。柱内组分分离后，进入检测器进行检测，从而实现对样品的分析。该方法已成为分离分析技术在化学、医学、工业、农业、商品检验和法律检验中的重要应用。

二、高效液相色谱法的优缺点

优点：分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，自动化操作，应用范围广；

与气相色谱法相比，具有以下优点：不受样品挥发性和热稳定性的限制，适用范围广；流动相种类繁多，通过优化流动相可以达到较高的分离效率；一般可以在室温下分析，不需要很高的柱温。

缺点：分析成本高，液相色谱仪价格和360日常维护费贵，分析时间一般比气相色谱长。

三、高效液相色谱法在分析实际样品时有哪些应用

1.对于分离，可以根据样品的组成优化流动相和固定相的组合。如果熟悉液相色谱是很有优势的，但是对于初学者来说比较难。2.适用样品范围广，80%的分析对象都可以用这种方法进行分析。3.高效的分离柱可用于轻松分离复杂的多组分混合物。4.将分离出的成分溶解在流动相中，可以全部回收。5.可以用多种高灵敏度、高选择性的无损检测器串联几个检测器，根据它们相应的特性，获得重要的定性信息。6.只能检测从色谱柱流出的组分。7.因为没有通用的高灵敏度检测器，所以在分析没有色谱峰的未知混合物时，无法确定原因是分离条件不当还是检测器没有响应。8.使用体积排阻色谱时，从低分子量到高分子量的样品全部流出，流出顺序从高分子量开始，因此可以根据保留容量估算分子量，最适合未知样品的组成分析。9、测定准确度好。因为进样精度优于气相色谱，所以可以使用绝对工作曲线。10.虽然示差折光检测器是一种通用检测器，但与气相色谱的热导检测器和氢火焰检测器相比，由于化合物之间的响应不同，用峰面积百分比寻找多种化合物组成的混合物存在很多问题。11、限制色谱柱的使用条件(温度、压力、流量等。).而且与气相色谱相比，性能随时间变化很大。必须在标准条件下用标准材料定期检查色谱柱的性能。如果根据不同的样品对象固定色谱柱，有利于色谱柱的寿命。12.制作色谱柱需要特殊的设备和特殊的技能。13.与气相色谱法相比，共存物质对分离的影响很小，因此易于制备分析样品。14.柱外死体积对色谱柱的性能有很大的综合影响，连接方式因仪器厂家而异。

四、液相色谱的用途！！？

高效液相色谱实验.色谱柱的评价

实验前请预习《基础分析化学实验（第二版）》页，137-140页。

【目标】

(1)了解HPLC的工作原理；

(2)学习液相色谱反相柱的评价方法。

[原则]

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。与经典的液相色谱相比，它采用高压输液泵和小颗粒填料，具有较高的柱效和分离能力。色谱柱是色谱仪的心脏

其中t0是死时间，通常由已知不会保留在色谱柱上的物质的峰时间决定。

相对保留值(选择因子)

其中k1’和k2’分别是两个相邻峰的容量因子，峰1的保留时间被规定为比峰2的保留时间短。

分辨率Rs

其中tr1、tr2为两个相邻峰的保留时间，Wb1、Wb2为两个峰的底部宽度。对于高斯峰值，Wb=1.70W1/2。

为了实现良好的分离，我们希望n、和Rs的值越大越好。一般分离(如=1.2，Rs=1.5)要求n达到2000。柱压通常为104 kPa或更低。本实验以多核芳香烃为测试物质，尿嘧啶为死时间标记物，对反相色谱柱进行评价。

[仪器和试剂]

Waters 510高效液相色谱仪(由Waters 510高压输液泵、Rheodyne 7725i采样器、440检测器和记录器组成)

色谱柱：5厘米4.6毫米内径，YWG-C18H37 (ODS)，10微米m

流动相：甲醇-水(80-20)

样品I:含有尿嘧啶(0.010mgml-1)、萘(0.010mgml-1)、联苯(0.010mgml-1)和菲(0.006mgml-1)的混合甲醇溶液；

样品:尿嘧啶的甲醇溶液；萘的甲醇溶液；联苯的甲醇溶液；菲的甲醇溶液。溶液浓度约为0.01mgmL-1；

【实验内容】

(1)准备流动相。按比例配制200mL色谱纯甲醇和色谱纯水溶液，混合均匀，超声脱气后加入仪器储液瓶中。

(2)检查电路连接和液路连接正确后，打开高压泵、检测仪和记录仪的电源。设定操作条件如下：流速为1.0mlmin-1，压力上限为2。

以上就是关于usp高效液相色谱法？的知识，后面我们会继续为大家整理关于高效液相色谱法的应用的知识，希望能够帮助到大家！