高效液相色谱法原理 高效液相色谱法的基本原理

网上有很多关于高效液相色谱法原理的问题，也有很多人解答有关高效液相色谱法的基本原理的知识，今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识，让我们一起来看下吧!

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一、高效液相色谱柱原理，柱保留时间和哪些因素有关？

二、高效液相色谱法原理

三、高效液相色谱原理

一、高效液相色谱柱原理，柱保留时间和哪些因素有关？

保留时间：样品流出色谱柱所需的时间。不同的物质在不同的色谱柱上用不同的流动相洗脱时会有不同的保留时间，所以保留时间是色谱分析中比较重要的参数之一。

保留时间由色谱中物质的分配系数决定：

其中Rt代表物质的保留时间，t0是色谱系统的死时间，即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间，由色谱柱的孔径、流动相的流速等因素决定。k是分配系数，vs和VM代表固定相和流动相的体积。该公式也称为色谱过程方程，是色谱中最基本的公式之一。

二、高效液相色谱法原理

1、 HPLC的原理是以液体为流动相，利用高压输注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲溶液等流动相泵入固定相的色谱柱中。色谱柱中的组分分离后，进入检测器进行检测。

2、 HPLC具有“四高一宽”的特点；

(1)高压：流动相为液体，流过色谱柱时受到很大阻力。为了快速通过色谱柱，必须对载液施加高压。

(2)速度快：分析速度快，载液流速快，比经典液相色谱快很多。通常分析一个样品需要15到30分钟，有些样品甚至可以在5分钟内完成，一般不到1小时。

(3)效率高：分离效率高。可以选择固定相和流动相，达到最佳的分离效果，比工业蒸馏塔和气相色谱仪高出许多倍。

(4)灵敏度高：紫外检测器可达0。01ng，样品体积在 l数量级。

(5)应用范围广：高效液相色谱可以分析70%以上的有机化合物，特别是沸点高、大分子、极性强、热稳定性差的化合物的分离分析，显示出优势。

三、高效液相色谱原理

高效液相色谱原理：以高压下的液体为流动相，采用极细颗粒、高效固定相的柱层析分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，弥补了气相色谱的不足。

在已知的有机化合物中，大约20%可以用气相色谱分析，而80%需要用高效液相色谱分析。高效液相色谱和气相色谱在基础理论上没有明显区别，但两者的主要区别在于作为流动相的液体和气体的性质不同。

高效液相色谱的构建

可分为高压输液泵、色谱柱、进样器、检测器、馏分收集器和数据采集处理系统。

高效液相色谱具有“四高一宽”的特点

高压：流动相是液体，流过色谱柱时受到很大阻力。为了快速通过色谱柱，必须对载液施加高压。

速度快：分析速度快，载液流速快，比经典液相色谱快很多。通常分析一个样品需要15 ~ 30分钟，有的样品甚至可以在5分钟内完成，一般不到1小时。

高效：分离效率高。可以选择固定相和流动相，达到最佳的分离效果，比工业蒸馏塔和气相色谱仪高出许多倍。

高灵敏度垂直检测：紫外检测器可达0.01ng，样品体积在 l量级.

应用范围广：高效液相色谱可以分析70%以上的有机化合物，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物的分离分析，显示出优异的分离性能

以上就是关于高效液相色谱法原理的知识，后面我们会继续为大家整理关于高效液相色谱法的基本原理的知识，希望能够帮助到大家！